重组蛋白质降解是较常见的事，但是分析鉴定上，却往往不是你想象的那么简单，因为，一旦降解发生，基本上就难见唯一性降解的，反而会有多种降解同时发生，如图1。电泳上可能是多个条带，也可能只是1个条带或几个条带，但组分却不少。

糖蛋白是重组药物中非常重要的一类，天然蛋白也有很多糖蛋白。众所周知，糖蛋白的糖结构是非常复杂的，甚至比氨基酸的组合还要复杂。如果是单修饰位点，糖链解析相对还容易点，而多位点修饰的糖蛋白的解析的难度就大幅度提高了。

如果糖蛋白发生了明显降解，结构解析的难度就是上述两种复杂度的乘积关系了。极核心的问题是，必须完全确定各组份的全长序列，这是极其困难的。如图1，由于是混合物，酶解肽段一定会包含理论序列的N-末端肽段和C-末端肽段，因此，肽段水平是不足以解析某一降解组分的末端序列的。一般来说，需要从“样品制备”到“蛋白水平解析”和“肽段水平解析”三方面综合进行才有可能解决。当序列解析完成后，还要对糖肽进行组合分析，这必须有相关软件来海量处理数据才行。极后，还需要进行必要的核实甚至某些验证。极终还可能只能解决主要组分的结构解析问题。

当然，抗体的糖修饰相对简单，糖结构均一性相对较好，它的降解研究相对较容易。

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【wkh, 2020-08-04 14:36:31】 【责任人 wkh】 [已阅读 1146 次]