2018-03-24 我写过1篇有关物质的个人观点：
http://www.tofms.org/bioinfo/list_tj_from_db_this.asp?username=wkh&idr=1b63b64f37c25ead

这几年有些重要的案例，特补充如下。

【1】聚合物有“共价”和“非共价”，一般还是“共存”模式，所以，需要区分。在生物技术药物中，非共价聚合体是极其常见的，只不过是关注者不多；体内蛋白很大一部分是非共价聚合体形式，有时也当成是“四级结构”。常见的“共价聚合体”多为二硫键重构所致，也有少数是链间脱水所致。“金属螯合聚合体”也有。

【2】降解物一旦被发现，一般就比较复杂，一般是“溃堤式”降解，本站发过多篇讨论文章。电泳很难精确分离降解物，因此需要多种手段来鉴定降解位点及其分布规律。降解物分析从来都不简单，所有号称简单的，是因为他们还没有深入进去。

【3】修饰的情况很多，除了常见的氧化、脱酰胺、乙酰化、磷酸化外，还会有很多其它修饰，有些修饰很难快速解析。最近几年发现的较多的有关物质修饰包括：Cys上的Cys修饰、谷胱甘肽修饰、多氧化修饰，K和R糖化Glycation（重组HSA特别常见，大肠表达常见），N-端脱水或脱氨环化，等。有些脂蛋白会出现修饰不均一情况，此时存在有关物质。对于糖蛋白来说，糖基化不是有关物质范围；但有些非糖蛋白也发生糖基化修饰，算有关物质。

【4】立体异构体是最复杂最难研究的有关物质，不仅考验分离能力是否强大，还需要高技巧的分析解析能力。三硫键在抗体等蛋白中时不时出现，FDA的EPO标准中就有此研究项目，国内关注不多，其实研究难度不大。IgG2的二硫键异构体不在此列。

【5】信号肽残余也是常见现象，我们就遇到很多案例，一般来说尽量纯化时去除。看来，优化信号肽序列及其对应的酶切体系是很重要的。

【6】未知有关物质，我们也遇到个案了，从完整分子量中，可以确定是非目标蛋白，但很难判断它可能是什么，必须当成【新蛋白】来研究，需要巨大的人力、财力和费用，还不一定能解决，此时，追踪工艺过程，采取尽量去除，是上策。

【7】对于生物技术药来说，有关物质到底如何限量？除了结构研究，还需要开展哪些评价研究？真是个很不简单的事。期待有关部门和人士共同商讨，最好出台一个具有可实施性的建议甚至指南。

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【wkh, 2023-08-09 16:33:31】 【责任人 wkh】 [已阅读 352 次]