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技术】【讨论】氨基酸组成分析哪个方法极准

目前为止,我们用过【1】酸水解茚三酮柱后衍生UV法,【2】酸水解OPA柱前衍生荧光法,【3】酸水解AQC衍生质谱MRM法,【4】碱水解OPA柱前衍生荧光法

目前,我们的结果显示,准确度【1】>【2】>【3】>【4】。非常吃惊的是,质谱MRM并没有显示出明显的优势,反而有多种氨基酸的效果比较差,这些氨基酸被认为串联质谱应该很好才合理,当然,不排除技术人员的熟练程度对结果的影响。

方法【1】的偏差很小,重复性也好,但是样品量巨大,对于昂贵的蛋白质药物来说,真是个大开支。OPA法用量少,综合看来,比较适合蛋白量少或制造成本高的蛋白质药物,尤其是天然蛋白质,肯定首先OPA。我们现在主要是 OPA-FMOC-UPLC方法测氨基酸组成,效果还不错。

为了做更完整的氨基酸分析,早先我采取过碱水解法,效果有限,后来就放弃了。



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【wkh, 2020-11-02 20:34:10】 【责任人 wkh】 [已阅读 587 次]


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