蛋白降解是个十分常见的现象,它可能发生在表达体系里,多数是酶的后果,适当加入蛋白酶抑制剂是重要的。还有就是介质环境下的非特异性水解,pH,温度,缓冲体系种类等都有影响。
如今质谱很强大了,当我们得到一个比较精确的分子量后,我们能迅速判断蛋白序列是否与预期一致,但是,我们肯定不能从分子量就推测出一个序列。不信的话,自己去计算一下,1Da偏差会对应多少蛋白,出乎你的意料!
有时候,我们测出了某蛋白的一个降解产物的分子量,我们如何快速【猜一猜】它的序列呢?我10多年前就写了这么个软件,给出原始序列,再给出实测分子量,然后指定偏差,偏差一般要大一点【因为可能有修饰,也考虑质谱仪器偏差】,本软件会全自动扫描序列,把所有设定偏差以内的序列都计算出来,从而得到一系列候选序列。
猜序列有时候有点用,但绝对不可以就此为止,测定Edman和LC-MS/MS是不可缺少的。
永远别仅仅从分子量来推定死一个序列!
永远别对糖蛋白等复杂修饰蛋白进行这个序列猜一猜。
永远要对猜的结果进行验证。
以下是软件网址,完全免费。
http://www.tofms.org/CalMW/PepSeq_wkh_index.asp
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【wkh, 2019-03-26 21:04:11】
【 123.151.77.81】
【责任人 wkh】
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