【快讯】独家解析核桃肽铁序列和铁螯合关键位点

核桃(Juglans regia)，又称胡桃、羌桃，与扁桃、腰果、榛子并称为世界著名的“四大干果”，味美且营养价值高，被誉为“万岁子”、“长寿果”，其功能越来越受到国内外专家的广泛关注。

近2年来，本实验室参与某研究所核桃酶解肽的研究，目标是鉴定铁螯合肽，开发高铁功能食品。首先，采集大量核桃干果后，结果预处理，再摸索一系列酶解条件，然后进行HPLC分离和成分鉴定。项目之初，该研究所采用测定色谱峰的螯合铁能力进行活性峰的筛选，为此，我们进行了大量MALDI-TOF筛选研究，但发现的潜在螯合铁的肽段不多。随后，我们提出，HPLC色谱峰如果已经含有足够量的铁，那么再进行铁螯合活性测定时，所得到的活性数据将明显偏低。这是一个重要建议，被研究人员接受，并重新开始了铁螯合肽段的鉴定研究，我们的建议及时避免了该项目科研方向出现重大偏差的风险。

该研究工作中发现，因国内外尚无专一的核桃序列数据库，因此，核桃水解物中是否含铁以及铁螯合位点的确认，成为该项目结构解析的关键和重点。目前没有成熟的方法学作参考，难度较大。

我们采用MALDI-TOF/TOF、LC-MS/MS对核桃水解物进行检测，经本实验室独创的“差异谱全自动检索”软件结合人工核对的方法对700多张（串联）质谱图进行筛选，成功确认该样品疑似加铁峰，并对核桃水解物主要成分的二级质谱进行De Novo测序，极终解析出多个铁螯合的关键序列，它们为富含相邻的某两个氨基酸，铁离子通过与其发生螯合从而发挥生物活性。该关键序列的成功解析为其它金属离子螯合位点的确认提供了理论参考。

【wkh, 2014-03-20 16:39:08】 【责任人 wkh】 [已阅读 996 次]