【公告】抗体药物结构解析技术领先一步

抗体系指机体在抗原性物质的刺激下所产生的一种免疫球蛋白(主要由淋巴细胞所产生)，因其能与细菌、病毒或毒素等异源性物质结合而发挥预防、治疗疾病作用。抗体类药物以其高特异性、有效性和安全性正在发展成为国际药品市场上一大类新型诊断和治疗剂。2010年美国市场的单抗药物销售额为185亿美元，世界范围内的单抗药物销售额总计已达400多亿美元，约是整个生物制药市场份额的36%。据预测，2014年抗体药物将成为世界上销售量极大的药物品种。近几年来，国内越来越多的药厂加入到抗体药物的研发行列，抗体药物结构确证是保障产品质量的关键。

自2010年以来，本实验室开展了10余家企业、近50个抗体药物的结构研究，目标是确证抗体药物的一级结构及高级结构，为药物产品质量控制提供科学数据。首先，结合分子量、等电点、HPLC纯度等检测确认抗体药物的基本性状；然后，结合肽质量指纹谱、N端序列、C端序列和序列覆盖率等测定确认抗体药物的一级结构；极后，通过二硫键、CD谱及其变性因素影响等研究，确证抗体药物的高级结构。通过多批次检测，考察批间一致性，并计算相似度。

抗体药物氨基酸多达1200多个，分子量高达150KDa，4条链的结构含有16对二硫键，给结构分析带来较大困难。为此，我们进行了大量的条件探索，尝试了多达12种酶解条件，发现轻链在酶解过程中会发生一定降解，并采取合理的措施解决了这一难以被发现的问题，极后得到的序列覆盖率在95%以上。在二硫键分析过程中，我们也找到了合适的方法解决了一次性匹配率低的问题，将二硫键识别率从60%提升至90%以上。

目前，我们已建立了成熟的抗体精确分子量测定方法，序列覆盖率高达95%以上的多酶切结合MALDI-TOF/TOF、LC-MS/MS双质谱检测方法，抗体药物糖修饰定性定量方法，以及C端K缺失修饰确定方法。我们可提供解析14对以上二硫键的多酶解结合软件和人工综合分析抗体等复杂二硫键的解决方案，为多家国内知名企业完成了多个品种的抗体结构确证项目，全部企业均已成功通过药监局的现场考核，申报材料提交到CFDA审评中心CDE，获得认可。

【wkh, 2014-04-10 12:16:39】 【 222.126.142.249】 【责任人 wkh】 [已阅读 1300 次]