复杂多链蛋白序列覆盖率分析、末端不均一分析、糖基化修饰位点分析等重要结构确证项目，如果直接采用溶液酶切，酶切产物过度复杂，如果直接分析，将可能有较高的假阳性，与非特异性酶切结果混合在一起的话，更是降低可靠性。

采用O18标记，从肽段C末端特征，可一定程度提高肽段鉴定的可靠性，但不能排除链间肽段的交叉干扰。混合溶液酶切还可能降低质谱采集效率，丢失信号稍低的肽段。

电泳分拆多链，然后胶内酶切结合O18标记，则可避免上述局限性，明显降低肽段复杂度，提高质谱检测效率，大幅度提升鉴定可靠性，尤其大幅度降低糖基化位点鉴定的假阳性。

极近，我们把变性非还原电泳、胶内酶切、O18标记和胶内切糖等多项技术联合起来，结合复杂的数据解析，在鉴定聚合体的交联位点方面取得了良好效果。

本策略不足是，O18用量较大，成本偏高。



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【wkh, 2018-04-04 20:18:19】 【责任人 wkh】 [已阅读 1155 次]