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项目进展】【惊】原辅料导致重组蛋白被谷胱甘肽修饰

谷胱甘肽在人体内很常见,是氧化型和还原型动态平衡状态,对细胞的某些氧化还原性质有一定影响,某些疾病与其有关。重组蛋白中,谷胱甘肽修饰比较少见,与具体表达体系有关。

近期,我们在某重组蛋白有关物质分析中,发现一些不常见的修饰组分,经过对还原前后的分子量比对分析,初步判断存在Cys被修饰的情况,尤其是存在侧链二硫键修饰产物。经过系列峰间差解析,都指向某一种修饰,而且一定是通过二硫键来实现的。

通过分子量偏移值和修饰特性,再调查表达体系的原材料,推测是谷胱甘肽修饰。然后采用多种酶切结合串联质谱技术,对系列物进行了鉴定,并对侧链离子碎片进行了归属分析,成功验证了这改重组蛋白的谷胱甘肽修饰。

本案例提示我们,表达体系的原辅料要进行仔细质控,避免存在一些反应性物质。特别需要指出的是,牛血清中经常含有一些非预期组分,使用前要特别注意质控,必要时,应开展一些成分研究。



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【wkh, 2020-04-13 13:56:45】 【责任人 wkh】 [已阅读 650 次]


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