某多肽药物，由重复序列子构成，MW1200Da左右。9月底发补到期了，企业特别着急。经同行引荐给我，发现其只补做一批等电点，本人认为不应该这样做药物研究，拒绝了。

上周五【2019.9.20】我们员工给我反馈说，该药物是委托上海某CRO进行结构确证，等电点一直未成功测出，采用的是胶条法。听此言，激发本人的兴趣了:凡是别的CRO做不出的项目，我都不惜成本要做，越有挑战的项目，我越有激情做。

于是，第一时间办理合同，并火速要企业快递样品。考虑周末快递会耽误时间，企业直接坐高铁来京送样，这个做法好！周六拿到样品，我们一方面仔细研究了其结构特征，一方面做了样品初评估，制定了成功率高的实验方案。

今天【周一】结果出来了，并非合成肽类常见的单峰而是一系列重叠峰。经过几种合理的缓冲体系分析比较，依然不能达到单峰，说明，此肽电荷异构体多。原因极可能是，重复序列子导致完整分子不均一。

该项目有几个小陷阱，上海某CRO可能中招了。一是，企业提供的等电点计算值是7.5，而实测值是10.5附近宽峰，非常极端，达到了我们极限的两性电解质和marker了。上海某CRO可能没想到。二是，胶条法测肽类等电点的技术要求较高，采用pI3~10完全不适合本样品。三是，测等电点时，应该尽可能是天然状态或原始状态，必要时进行一定的前处理，但一定要有度！科学研究坚持底线特别重要。

很多人喜欢依赖网上的软件计算蛋白质和多肽的等电点等物理参数，我的经验是，一定要谨慎，因为，几乎很少有人在计算中考虑空间结构的影响。



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【wkh, 2019-09-23 21:26:17】 【责任人 wkh】 [已阅读 973 次]